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光學(xué)顯微鏡觀(guān)察方式大盤(pán)點(diǎn)：明場(chǎng)

光學(xué)顯微鏡適用于多種檢材，如組織切片、活細(xì)胞、電路板等。不同檢材光學(xué)特性差異大，需使用不同觀(guān)察方式，主要有明場(chǎng)、相差、熒光、偏光、DIC、暗場(chǎng)、霍夫曼相襯七大方式。

一臺(tái)光學(xué)顯微鏡可能擁有一種或多種觀(guān)察方式，今天我們先來(lái)說(shuō)說(shuō)明場(chǎng)觀(guān)察方式。

（1）成像原理

明場(chǎng)觀(guān)察是光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)的觀(guān)察方式，其利用可見(jiàn)光（約400-700nm）作為照明光源，光線(xiàn)相位、照射角度等性質(zhì)不作改變，直接照射在樣品上進(jìn)行成像。

明場(chǎng)觀(guān)察有透射照明和反射照明兩種照明方式，前者是照明光線(xiàn)透過(guò)樣品后進(jìn)入物鏡，主要適合有透明度的薄樣品；后者是照明光線(xiàn)照射到樣品后反射進(jìn)入物鏡，主要適合不透明的厚樣品。

透射與反射（落射）光路示意圖

（2）關(guān)鍵部件

明場(chǎng)觀(guān)察不需要特殊的部件，其效果主要受光源和聚光鏡影響。光源有兩項(xiàng)核心規(guī)格，色溫和顯色性。聚光鏡核心規(guī)格是數(shù)值孔徑。

傳統(tǒng)以鹵素?zé)舻茸鳛楣庠?，其特點(diǎn)是色溫偏暖，約3000K，亮度越低色溫越暖。人眼觀(guān)察較為舒適，顯色性高，但一般需要在光源處使用RBD日光濾光片或藍(lán)色濾光片校正色溫，否則對(duì)于樣本中紅染、黃染等細(xì)節(jié)的分辨很差。主要缺點(diǎn)是發(fā)熱大、使用不當(dāng)容易燒，另外用濾色片校正色溫會(huì)損失光強(qiáng)，對(duì)拍照有影響。 

使用技巧：關(guān)鹵素?zé)艄庠辞跋劝压鈴?qiáng)調(diào)低。以高光強(qiáng)啟動(dòng)鹵素?zé)羧菀讓?dǎo)致燈泡燒壞，調(diào)低光強(qiáng)再關(guān)，可以避免下次開(kāi)燈時(shí)意外燒壞燈泡。LED光源則基本不影響，但養(yǎng)成好習(xí)慣總是有益的。

目前專(zhuān)業(yè)LED光源已逐步成為主流，其色溫恒定在5000K左右，接近日光的平均色溫，顯色性較好，人眼觀(guān)察和數(shù)字相機(jī)成像都有較好效果。此外LED光源功耗低亮度高，一般3W LED可以達(dá)到30W鹵素?zé)艄鈴?qiáng)，方便即開(kāi)即用，壽命長(zhǎng)，免維護(hù)，因此明美大部分顯微鏡均默認(rèn)采用LED作為明場(chǎng)光源，鹵素?zé)魟t作為可選。

左圖：鹵素?zé)粽彰鳎挥覉D：LED燈照明

聚光鏡會(huì)有倍數(shù)刻度或者數(shù)值孔徑刻度，一般調(diào)到物鏡對(duì)應(yīng)的倍數(shù)，或者比物鏡數(shù)值孔徑稍低的數(shù)值即可。更準(zhǔn)確的調(diào)試方式，拔出目鏡，邊調(diào)節(jié)孔徑光闌邊從觀(guān)察筒觀(guān)察物鏡后焦平面，當(dāng)畫(huà)面占視野3/4左右時(shí)效果好，但不建議頻繁這樣操作，因?yàn)槿菀鬃層^(guān)察筒進(jìn)灰。

產(chǎn)品小知識(shí)1：除了數(shù)值孔徑，聚光鏡還有消色差、消球差等規(guī)格區(qū)別，在40X以上會(huì)對(duì)成像質(zhì)量有較大影響，所以并不是數(shù)值孔徑高就等于更好。

產(chǎn)品小知識(shí)2：如果您想使用超低倍2X物鏡，您需要選配搖出式聚光鏡。

（3）成像特點(diǎn)

明場(chǎng)觀(guān)察能較好地呈現(xiàn)樣品色彩，但襯度較低，尤其是透射照明的明場(chǎng)中。在透射照明成像過(guò)程中，帶有樣品信息的光線(xiàn)與背景光線(xiàn)混合在一起，這使樣品淺色部分與背景對(duì)比度較低，遇到活細(xì)胞等透明樣品基本看不出細(xì)節(jié)。因此，該觀(guān)察方式適合已經(jīng)染色樣品或本身有顏色的樣品進(jìn)行成像。

（4）主要應(yīng)用

①醫(yī)學(xué)診斷：HE、IHC等染色病理切片檢驗(yàn)

明美研究級(jí)生物顯微鏡ML51-N明場(chǎng)觀(guān)察樣品圖

左圖：HE 組織病理切片樣品  右圖：IHC 免疫組化樣品

②材料分析：金相組織、電路芯片等。

明美金相顯微鏡MJ43拍攝的明場(chǎng)金相組織

③生物學(xué)研究：如觀(guān)察組織器官、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、微生物等。

明美體視顯微鏡MZX100拍攝的蜜蜂

（5）明美產(chǎn)品

①生物顯微鏡

產(chǎn)品：ML11/ML31/ML41/ML51

• 配置白光LED光源，成像明亮清晰

• 采用無(wú)限遠(yuǎn)光路系統(tǒng)，可靈活升級(jí)配置

• 適用于教學(xué)、科研、醫(yī)療診斷等場(chǎng)景

②金相顯微鏡

產(chǎn)品：MJ31/MJ33/MJ43/MJ41-LED/MJ42

• 可配置LED或鹵素?zé)舻裙庠?，滿(mǎn)足不同觀(guān)察習(xí)慣

• 配置長(zhǎng)工作距離金相物鏡，成像清晰，對(duì)比度高

• 適用于工業(yè)、材料學(xué)等觀(guān)察場(chǎng)景

③體式顯微鏡

產(chǎn)品：MZ62/MZ101

• 獨(dú)立雙光路系統(tǒng)設(shè)計(jì)，成像具有立體感

• 可配備透射與反射LED光源，適配不同檢材

• 可適用于常規(guī)生物醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，科研研究和工業(yè)檢測(cè)等高精度觀(guān)察領(lǐng)域

④顯微鏡相機(jī)

產(chǎn)品：MSX11/MSX2/MSX1/MDX10

• 大靶面尺寸感光芯片，高像素設(shè)計(jì)，細(xì)節(jié)成像更清晰

• 靈敏度高，色彩還原性好

• 軟件易用，可搭配明美及其他品牌顯微鏡

本期的文章就到這里，希望對(duì)大家有幫助，下一期我們介紹相差觀(guān)察。

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