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顯微成像·洞察微觀之美

Microscopic imaging, insight into the beauty of micro

首頁(yè) 行業(yè)動(dòng)態(tài) 技術(shù)分享 熒光顯微鏡下的細(xì)胞紅綠燈

熒光顯微鏡下的細(xì)胞紅綠燈

發(fā)布時(shí)間:2025-11-07

訪問(wèn)量:92

近日,“新國(guó)標(biāo)紅綠燈”、“新版紅綠燈”話題引發(fā)熱議,直沖各大平臺(tái)熱搜榜,很多人紛紛驚呼這設(shè)計(jì)是要搞出大量交通事故,幸好證實(shí)是虛驚一場(chǎng),這種設(shè)計(jì)只會(huì)在少數(shù)情況下使用,不會(huì)推廣。在細(xì)胞中,其實(shí)也存在運(yùn)輸系統(tǒng)和紅綠燈,可以用熒光顯微鏡可視化觀察,相關(guān)研究還曾獲2013年諾貝爾獎(jiǎng),比新版紅綠燈有意思,一起來(lái)了解下吧!


細(xì)胞中的“車輛”和“高速公路”

細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的定位、遷移和胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸,依賴于馬達(dá)蛋白和微管(Microtubule,簡(jiǎn)稱MT)的相互作用,前者相當(dāng)于“車輛”,而后者相當(dāng)于“高速公路”。2013年詹姆斯·羅斯曼、蘭迪·謝克曼和托馬斯·聚德霍夫3位科學(xué)家因發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制,獲得了2013年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。


細(xì)胞中的車輛和高速公路①

細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的定位、遷移和胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸,依賴于馬達(dá)蛋白和微管(Microtubule,簡(jiǎn)稱MT)的相互作用,前者相當(dāng)于“車輛”,而后者相當(dāng)于“高速公路”。2013年詹姆斯·羅斯曼、蘭迪·謝克曼和托馬斯·聚德霍夫3位科學(xué)家因發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制,獲得了2013年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。


兩種馬達(dá)蛋白在微管上相向而行②

馬達(dá)蛋白有非常多種,通常關(guān)注的有兩種,動(dòng)力蛋白Dynein和驅(qū)動(dòng)蛋白Kinesin,兩種“車輛”運(yùn)動(dòng)方向剛好相反,前者主要負(fù)責(zé)從細(xì)胞的周圍到細(xì)胞的中心運(yùn)載細(xì)胞器和囊泡等貨物,后者主要負(fù)責(zé)從細(xì)胞的中心到細(xì)胞的中心運(yùn)載貨物,順便會(huì)把前者帶出來(lái)。

熒光顯微鏡如何看到細(xì)胞中的車輛和公路?


熒光顯微鏡下的細(xì)胞微管(紅)和動(dòng)力蛋白(綠)②

動(dòng)力蛋白、驅(qū)動(dòng)蛋白和微管的相關(guān)研究通常在小鼠、果蠅等模式生物或培養(yǎng)細(xì)胞上進(jìn)行,微管可以使用Tubulin紅色熒光標(biāo)記染色,動(dòng)力蛋白和驅(qū)動(dòng)蛋白一般利用GFP標(biāo)記為綠色,由于觀察目標(biāo)非常小,因此一般建議使用MF43-N等研究級(jí)正置熒光顯微鏡,搭配高放大倍數(shù)、高數(shù)值孔徑的60X油鏡或100X油鏡。


熒光成像延時(shí)攝影②

為了觀察和記錄動(dòng)力蛋白/驅(qū)動(dòng)蛋白隨時(shí)間移動(dòng)的情況,還需要用到類似MC50-S等高靈敏度的顯微鏡相機(jī),進(jìn)行延時(shí)攝影或視頻錄制,比如每300ms左右拍攝一張圖片或抽取視頻幀,然后多張圖片疊加,即可分析出移動(dòng)路徑。

細(xì)胞交通中的紅綠燈MAPs


明美MC50-S相機(jī)下的神經(jīng)元熒光成像

動(dòng)力蛋白、驅(qū)動(dòng)蛋白的運(yùn)輸運(yùn)動(dòng),受微管相關(guān)蛋白MAPs(Microtubule-Associated Protein)調(diào)節(jié),因此MAPs蛋白又被稱為“細(xì)胞交通中的紅綠燈”,利用熒光標(biāo)記技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)神經(jīng)元的MAPs清晰成像。


明美MC50-S相機(jī)下的熒光成像

在神經(jīng)細(xì)胞領(lǐng)域,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)MAP2、tau和MAP1b等微管相關(guān)蛋白MAPs會(huì)影響動(dòng)力蛋白、驅(qū)動(dòng)蛋白,在小鼠活體實(shí)驗(yàn)中單獨(dú)敲除單個(gè)MAP不一定導(dǎo)致問(wèn)題,表明這些MAPs可能有互補(bǔ)關(guān)系,就像紅綠燈壞掉其中一個(gè),并不會(huì)讓交通信號(hào)完全無(wú)法判斷


MAP1B變異(綠)導(dǎo)致神經(jīng)元退化(紅)③

但基因突變等問(wèn)題導(dǎo)致MAPs異常,就可能引發(fā)神經(jīng)元退化等問(wèn)題,比如MAP1B變異導(dǎo)致神經(jīng)元退化、tau蛋白異常磷酸化導(dǎo)致阿茲海默癥,這就像紅綠燈異常亮起,紅黃綠全亮,車輛就摸不著頭腦該走還是該停了。

相關(guān)研究還在繼續(xù)深入中


熒光顯微鏡MF43-N

“細(xì)胞紅綠燈”非常有意思,值得深入,相關(guān)研究還在繼續(xù)進(jìn)行中,因?yàn)樾枰罴?xì)胞成像,因此研究級(jí)熒光顯微鏡在其中依舊扮演著重要的角色,如果您有需要進(jìn)行相關(guān)的研究,我們推薦使用明美MF43-N正置熒光顯微鏡,成像質(zhì)量高,使用方便,近年也有多位老師使用這款顯微鏡完成了高質(zhì)量論文的發(fā)布,您和驚艷的熒光成像效果,可能就只差一通電話和一場(chǎng)試用。

附錄:
①Source:learn.genetics.utah.edu
②DOI:10.1242/jcs.115.7.1453 Source:PubMed
③DOI: 10.1523/JNEUROSCI.2757-14.2015 Source: PubMed

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